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              1. 薄層色譜硅膠板

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                柱層層析硅膠粉淺析硅膠柱層析的方法

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                柱層層析硅膠粉淺析硅膠柱層析的方法

                發布日期:2018-06-04 作者: 點擊:

                柱層層析硅膠粉


                柱層層析硅膠粉淺析硅膠柱層析的方法:


                1.稱量,200-300目硅膠,稱30-70倍于上樣量,如果極難分,也可以用100倍量的硅膠H.干硅膠的視密度在0.4左右,所以要稱40g硅膠,用燒杯量100ml也可以。

                2.攪成勻漿,加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌.如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系,就用石油醚拌,如果洗脫劑是氯仿/醇體系,就用氯仿拌.如果不能攪成勻漿,說明溶劑中含水量太大,尤其是乙酸乙酯/丙酮,如果不與水配伍走分配色譜的話,必須預先用無水硫酸鈉久置干燥.氯仿用無水氯化鈣干燥,以除去1%的醇.如果樣品對酸敏感,不能用氯仿體系過柱。

                3.裝柱,將柱底用棉花塞緊,不必用海沙,加入約1/3體積石油醚,氯仿,裝上蓄液球打開柱下活塞,將勻漿一次傾入蓄液球內.隨著沉降,會有一些硅膠沾在蓄液球內用石油醚,氯仿,將其沖入柱中。

                4.壓實,沉降完成后,加入更多的石油醚,用雙聯球或氣泵加壓,直至流速恒定.柱床約被壓縮至9/10體積.無論走常壓柱或加壓柱,都應進行這一步,可使分離度提高很多,且可以避免過柱時由于柱床萎縮產生開裂。

                5.上樣,干法濕法都可以.海沙是沒必要的.上樣后,加入一些洗脫劑,再將一團脫脂棉塞至接近硅膠表面.然后就可以放心地加入大量洗脫劑,而不會沖壞硅膠表面。

                6.過柱和收集,柱層析實際上是在擴散和分離之間的權衡.太低的洗脫強度并不好推薦用梯度洗脫.收集的例子,10mg上樣量,1g硅膠H,0.5ml收一餾分,1-2g上樣量,50g硅膠,200-300目,20-50ml收一餾分。

                7.檢測,要更多地使用專用噴顯劑,如果僅用紫外燈,會損失較多產品,紫外的靈敏度一般比噴顯劑底1-2個數量級。

                8.送譜,收集的產品旋干,在送譜前通常需要重結晶.如果樣品太少或為液體,可過一小凝膠柱,作為送譜前的最后純化手段.可除去氫譜1.5ppm左右所謂的"硅膠"峰。


                今天柱層層析硅膠粉小編就講到這,更多關于硅膠方面的知識請持續關注維啟化工。  


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